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古典豬瘟病毒熒光PCR檢測(cè)試劑盒

簡要描述:古典豬瘟病毒熒光PCR檢測(cè)試劑盒,雅吉生物是一家生物企業(yè)主營ATCC細(xì)胞,細(xì)胞系,原代細(xì)胞,重組蛋白,ELISA試劑盒、免疫組化試劑盒、抗體、熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒、動(dòng)物血清和培養(yǎng)試劑等

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間:2024-12-17
  • 訪  問  量:571

詳細(xì)介紹

本產(chǎn)品僅供科研,不得做其它用途

更多產(chǎn)品詳細(xì)信息可免費(fèi)向客服索取訂購。

本產(chǎn)品就是根據(jù)PCR原理專門開發(fā)的試劑盒,它具有下列特點(diǎn):

1. 即開即用,用戶只需要提供樣品DNA模板。

2. 提供陽性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。

3. 產(chǎn)品精心優(yōu)化且特異性高,引物是根據(jù)高度保守區(qū)設(shè)計(jì),不會(huì)跟除此之外的其它微生物DNA發(fā)生交叉反應(yīng)。

4. PCR mix中含上樣染料,PCR后可以直接上樣電泳。

5. 本產(chǎn)品足夠50次20μL體系的PCR反應(yīng)。

6. 本產(chǎn)品只能用于定性實(shí)驗(yàn),不能用于定量。

7. 本產(chǎn)品只能用于科研

古典豬瘟病毒熒光PCR檢測(cè)試劑盒

古典豬瘟病毒熒光PCR檢測(cè)試劑盒樣品的制備 

1. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取反應(yīng),多出的兩個(gè)中一個(gè)是 PC(樣品制備陽性對(duì)照),一個(gè)是 NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢杂?10μL 牛乳頭瘤病毒 PCR 陽性對(duì)照(1×10E6 拷貝/μL,本試劑盒提供)再加上一定量的水作為制備的陽性對(duì)照(加水后其總體積跟樣品一樣,樣品體積多少取決于所用試劑盒的要求)??梢杂盟鳛橹苽涞年幮詫?duì)照。

2. 用自選方法純化上述 N+2 個(gè)樣品的 DNA。本試劑盒跟市場上大多數(shù)細(xì)菌提取試劑盒兼容。

電泳分析 

1. 取 5-10uL 擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行常規(guī)瓊脂糖電泳,檢測(cè)擴(kuò)增效果,由于擴(kuò)增產(chǎn)物較短,建議用 1.5%-2.0%的瓊脂糖凝膠。

2. 陽性樣品預(yù)期得到的擴(kuò)增產(chǎn)物長度為 200bp 左右。如果兩個(gè)陰性對(duì)照(樣品制備陰性對(duì)照或 PCR 陰性對(duì)照)有此擴(kuò)增產(chǎn)物,說明環(huán)境污染,則整個(gè)實(shí)驗(yàn)無效,不需要分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

3. 如果所有樣品和 PCR 陽性對(duì)照均無此擴(kuò)增產(chǎn)物,則說明有系統(tǒng)性的問題(試劑、設(shè)備、程序、操作等),需要重復(fù)并排查原因。

4. 如果沒有上述兩種情況,則實(shí)驗(yàn)有效,可以分析樣品的擴(kuò)增結(jié)果。N+2 個(gè)樣品中有擴(kuò)增產(chǎn)物的判定為陽性,無則判定為陰性。

使用方法:

一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E1-10E6 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。

由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供無傳染性的 DNA 片段作為陽性對(duì)照。

1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2,1。

2. 用帶芯槍頭分別加入 45μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液,最好用帶芯槍頭,下同。

3. 在 6 號(hào)管中加入 5μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

4. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

5. 換槍頭,在 4 號(hào)管中加入 5μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E4 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

歡迎新老客戶咨詢訂購:古典豬瘟病毒熒光PCR檢測(cè)試劑盒



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